西尼羅河檢測試劑通過特異性檢測西尼羅病毒的核酸片段,可用于臨床或科研上對由西尼羅病毒感染引起的相關(guān)疾病的診斷。西尼羅河病毒是一種腦炎病毒,以鳥類為主要的貯存宿主,馬、蚊子和人都可以是它的傳染宿主。所有未接觸過西尼羅河病毒的人都是易感者,老年人和免疫力弱者易發(fā)病、病死率高。
檢測試劑特點:
1、即開即用,用戶只需要提供樣品DNA模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2、引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的PCR產(chǎn)物長度為560bp。
3、PCRmix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
4、提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
西尼羅河檢測試劑是基于雙夾心法原理。未知的樣本與質(zhì)控品加入到微孔(包被有抗人IgM)中進(jìn)行溫育,樣本中的特異性抗體會結(jié)合到微孔板上。洗板之后分別加入西尼羅河病毒抗原(WNRA)和普通細(xì)胞抗原(NCA)進(jìn)行反應(yīng)。
再次洗板后加入酶聯(lián)物,用于檢測所結(jié)合的抗原。三次洗板后加入底物液,一段時間后加入終止液終止顏色反應(yīng),溶液變?yōu)辄S色。450nm下測量OD值。結(jié)果中WNRA與NCA的比值ISR可用于結(jié)果的判定。
西尼羅河檢測試劑用耐高溫的TaqDNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。