- 產(chǎn)品描述
偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測試劑盒使用說明
產(chǎn)品咨詢:
臨床意義
豬偽狂犬gE鑒別ELISA診斷試劑盒用于檢測豬血清中抗偽狂犬病毒gE蛋白的抗體。用于區(qū)別臨床野毒感染豬和用gE基因缺失疫苗免疫的豬。
操作程序
1.洗滌液配制:使用前,濃縮的洗滌液應恢復至室溫(25℃左右),并搖動使沉淀的鹽溶解(在37℃水中加熱5-10),然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,稀釋好的洗滌液在4℃可以存放7天。
2.樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清按1:40稀釋,如取5ul血清與195ul樣本稀釋液,充分混勻;注意:陽性對照和陰性對照也按1:40稀釋。
3.加樣反應:取出所需反應板條,將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。陰性對照和陽性對照各設2孔,每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),置37℃溫育30分鐘。甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗板5次,200μl/孔,每次靜置3分鐘倒掉,再在干凈吸水紙上拍干。
4.加酶反應:每孔加酶結合物(1號液)2滴(100μl),置37℃溫育30分鐘。洗滌5次, 方法同3。切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5.顯色反應:每孔先加底物(3號液)一滴(50µl)、再加顯色劑(4號液)一滴(50µl),混勻,室溫(18℃-25℃)避光顯色10分鐘。每孔加終止液(6號液) 1滴(50μl),10分鐘內(nèi)測定結果(檢測前在震蕩器上輕輕震動一下)。
結果判斷
在酶標儀上測各孔OD630值,試驗成立的條件是陽性對照孔OD630值應≥0.8,陰性對照孔OD630值平均值必須低于0.3。 樣品孔OD630值大于0.33,判為陽性;樣品孔OD630值小于0.30,判為陰性, 樣品OD630值在0.30到0.33之間,判為可疑。
注意事項
1.試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.待檢血清樣品數(shù)量較多時,應先使用血清稀釋板稀釋完所有要檢測血清,再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到檢測板, 使反應時間*。
3.濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋,如果發(fā)現(xiàn)有結晶加熱使其溶解后再使用。
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