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偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測(cè)試劑盒使用說明

偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測(cè)試劑盒使用說明

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豬偽狂犬gE鑒別ELISA診斷試劑盒用于檢測(cè)豬血清中抗偽狂犬病毒gE蛋白的抗體。用于區(qū)別臨床野毒感染豬和用gE基因缺失疫苗免疫的豬。

  • 產(chǎn)品描述

 

 偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測(cè)試劑盒使用說明
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臨床意義
      豬偽狂犬gE鑒別ELISA診斷試劑盒用于檢測(cè)豬血清中抗偽狂犬病毒gE蛋白的抗體。用于區(qū)別臨床野毒感染豬和用gE基因缺失疫苗免疫的豬。

操作程序
1.洗滌液配制:使用前,濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫(25℃左右),并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解(在37℃水中加熱5-10),然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,稀釋好的洗滌液在4℃可以存放7天。
2.樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清按1:40稀釋,如取5ul血清與195ul樣本稀釋液,充分混勻;注意:陽性對(duì)照和陰性對(duì)照也按1:40稀釋。

3.加樣反應(yīng):取出所需反應(yīng)板條,將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測(cè)板孔中。陰性對(duì)照和陽性對(duì)照各設(shè)2孔,每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),置37℃溫育30分鐘。甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗板5次,200μl/孔,每次靜置3分鐘倒掉,再在干凈吸水紙上拍干。
4.加酶反應(yīng):每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液)2滴(100μl),置37℃溫育30分鐘。洗滌5次, 方法同3。切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5.顯色反應(yīng):每孔先加底物(3號(hào)液)一滴(50µl)、再加顯色劑(4號(hào)液)一滴(50µl),混勻,室溫(18℃-25℃)避光顯色10分鐘。每孔加終止液(6號(hào)液) 1滴(50μl),10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果(檢測(cè)前在震蕩器上輕輕震動(dòng)一下)。


結(jié)果判斷
       在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD630值,試驗(yàn)成立的條件是陽性對(duì)照孔OD630值應(yīng)≥0.8,陰性對(duì)照孔OD630值平均值必須低于0.3。 樣品孔OD630值大于0.33,判為陽性;樣品孔OD630值小于0.30,判為陰性, 樣品OD630值在0.30到0.33之間,判為可疑。


注意事項(xiàng)
      1.試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
      2.待檢血清樣品數(shù)量較多時(shí),應(yīng)先使用血清稀釋板稀釋完所有要檢測(cè)血清,再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板, 使反應(yīng)時(shí)間*。
     3.濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。

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