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剛果出血熱病毒ELISA檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

克里米亞-剛果出血熱病毒屬于布尼亞（布尼奧羅）病毒科的內(nèi)羅病毒屬。病毒顆粒呈圓形和橢圓形，直徑約85～120納米，外被包膜。光學(xué)鏡下在鼠腦的感染組織中可見(jiàn)到吉姆薩染色呈嗜堿性的有如紅細(xì)胞大小的胞質(zhì)包涵體，而在電鏡下的超薄切片中可辨認(rèn)包涵體所集聚的核糖體樣致密顆粒，這些可能是抗原或病毒亞單位結(jié)構(gòu)。該病毒通過(guò)蜱蟲(chóng)叮咬或在屠宰動(dòng)物過(guò)程中和屠宰后與病毒感染的組織接觸而進(jìn)行傳播。

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基于此原理，Hugh和Leifson提出一種含有低有機(jī)氮的培養(yǎng)基，用以鑒定細(xì)菌從糖類(lèi)產(chǎn)酸是屬氧化型產(chǎn)酸或發(fā)酵型產(chǎn)酸。這一試驗(yàn)廣泛用于細(xì)菌鑒定。一般用葡萄糖作為糖類(lèi)代表。也可利用這一基礎(chǔ)培養(yǎng)基來(lái)測(cè)定細(xì)菌從其他糖類(lèi)或醇類(lèi)產(chǎn)酸的能力。

一、Hugh-Leifson培養(yǎng)基組分

蛋白胨                   2g

氯鈉                   5g

磷酸氫二鉀               0.3g

瓊脂                     4g

葡萄糖                   10g

0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液     12mL

蒸餾水                   1000mL

二、配制制法

1、將蛋白胨、氯化鈉和磷酸氫二鉀加水溶解，調(diào)節(jié)pH至7.2。

2、加入葡萄糖、瓊脂煮沸，溶化瓊脂。

3、加入指示劑0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液。

4、混勻后，分裝試管，121℃高壓滅菌15min，直立凝固備用。

三、試驗(yàn)方法

1、細(xì)菌接種 ：以18-24h的幼齡菌種，穿刺接種在上述制備的Hugh-Leifson培養(yǎng)基中，每株菌接4管，其中2管用油封蓋（凡士林和液體石蠟按1:1比例混合后滅菌），也可于接種后滴加溶化的1%瓊脂液于表面進(jìn)行封蓋，約加0.5-1厘米厚，以隔絕空氣為閉管。另2管不封油為開(kāi)管，同時(shí)還要有不接種的閉管作對(duì)照。適溫培養(yǎng)1、2、4、7天觀察結(jié)果。

2、結(jié)果觀察：

（1）氧化型產(chǎn)酸：僅開(kāi)管產(chǎn)酸，氧化作用弱的菌株往往先在上部產(chǎn)堿（1-2天），后來(lái)才稍變酸。

（2）發(fā)酵型產(chǎn)酸：開(kāi)管及閉管均產(chǎn)酸，如產(chǎn)氣，則在瓊脂柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡。

PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)技術(shù)，也是DNA測(cè)序的必須步驟。PCR技術(shù)自出現(xiàn)以來(lái)，就被廣泛用于生物學(xué)的各個(gè)研究領(lǐng)域，對(duì)生物學(xué)的發(fā)展起到了極大的推動(dòng)作用。然而，相比于其他分子技術(shù)，PCR技術(shù)出現(xiàn)以后發(fā)展緩慢，至今沒(méi)有大的改進(jìn)與創(chuàng)新，是高通量測(cè)序與規(guī)?；瘷z測(cè)的一個(gè)限制因素。