- 產(chǎn)品描述
【用途】
用來檢測(cè)雞血清中的禽腦脊髓炎病毒(AEV)抗體
【試驗(yàn)原理】
禽腦脊髓炎,也稱雛雞傳染性顫搐病,主要通過雞蛋傳播,感染雞和易感雞或成年禽之間亦可發(fā)生水平傳播。青年雞(1~4周齡)主要臨床表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、麻痹或頭頸快速震顫等癥狀,成年雞表現(xiàn)為產(chǎn)蛋能力下降。血清中的病毒抗體可通過酶聯(lián)免疫的方法檢測(cè)。血清中的AEV抗體水平及整個(gè)雞群的免疫狀況可用ELISA方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
將滅活的AEV抗原包被在微孔板上,加入稀釋后的血清并孵育,血清中的抗AEV抗體將與包被在微孔板上的AEV結(jié)合,形成AEV抗原-抗體復(fù)合物。然后洗掉未結(jié)合的物質(zhì),加堿性磷酸酶標(biāo)記的抗雞IgG的酶標(biāo)結(jié)合物至微孔板中,酶標(biāo)物將與AEV抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。孵育后洗掉未結(jié)合的結(jié)合物,然后加入底物溶液。底物與堿性磷酸酶反應(yīng)并生成一種有顏色的產(chǎn)物,zui后終止反應(yīng),將顏色固定。顏色的深淺可用酶標(biāo)儀(405-410nm)測(cè)定。
【一個(gè)微孔板所需的試劑的量】
用來檢測(cè)雞血清中的禽腦脊髓炎病毒(AEV)抗體
【試驗(yàn)原理】
禽腦脊髓炎,也稱雛雞傳染性顫搐病,主要通過雞蛋傳播,感染雞和易感雞或成年禽之間亦可發(fā)生水平傳播。青年雞(1~4周齡)主要臨床表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、麻痹或頭頸快速震顫等癥狀,成年雞表現(xiàn)為產(chǎn)蛋能力下降。血清中的病毒抗體可通過酶聯(lián)免疫的方法檢測(cè)。血清中的AEV抗體水平及整個(gè)雞群的免疫狀況可用ELISA方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
將滅活的AEV抗原包被在微孔板上,加入稀釋后的血清并孵育,血清中的抗AEV抗體將與包被在微孔板上的AEV結(jié)合,形成AEV抗原-抗體復(fù)合物。然后洗掉未結(jié)合的物質(zhì),加堿性磷酸酶標(biāo)記的抗雞IgG的酶標(biāo)結(jié)合物至微孔板中,酶標(biāo)物將與AEV抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。孵育后洗掉未結(jié)合的結(jié)合物,然后加入底物溶液。底物與堿性磷酸酶反應(yīng)并生成一種有顏色的產(chǎn)物,zui后終止反應(yīng),將顏色固定。顏色的深淺可用酶標(biāo)儀(405-410nm)測(cè)定。
【一個(gè)微孔板所需的試劑的量】
抗原包被微孔板 | 12×8條(板) |
樣品稀釋液(1×) | 120ml |
洗滌液(1×) | 500ml |
陽(yáng)性對(duì)照 | 2μl |
陰性對(duì)照 | 2μl |
結(jié)合物 | 12ml |
底物液 | 12ml |
終止液 | 12ml |
【所需物品】
1. 能夠吸取2μl、100μl和800μl的精確移液器
2. zui大吸取100μl的多通道移液器
3. 計(jì)時(shí)器
4. 量筒
5. 蒸餾水
6. 洗板機(jī)
7. 稀釋用容器
8. 能夠讀雙波(405-410nm和630-650nm)的酶標(biāo)儀,OD值讀數(shù)zui大可達(dá)到3.0
【樣品收集】
采集至少0.5ml全血,分離血清并放在冰箱里,2-7℃用于短期儲(chǔ)存,如果長(zhǎng)期儲(chǔ)存,應(yīng)冷凍,且避免反復(fù)凍溶。如果樣品含有可見的顆粒物質(zhì),應(yīng)在檢測(cè)之前將其離心除去,嚴(yán)重污染的樣品不允許使用(如高度渾濁、細(xì)菌污染等)
【結(jié)果計(jì)算】
將陽(yáng)性對(duì)照吸光度值和樣品吸光度值分別減去陰性對(duì)照吸光度值,注意:對(duì)照品及樣品吸光度值都應(yīng)該是2個(gè)重復(fù)孔的平均值。每個(gè)樣品的計(jì)算式如下:
樣品平均吸光度值-陰性對(duì)照吸平均吸光度值 | =樣品與陽(yáng)性對(duì)照比值(Sp) |
陽(yáng)性對(duì)照平均吸光度值-陰性對(duì)照平均吸光度值 |
Sp ×(100)= ELISA Unit (EU) 陽(yáng)性對(duì)照值設(shè)為100 EU
【結(jié)果判定及EU單位說明】
AEV ELISA 值 說明
小于15EUs AEV抗體為陰性
15-25 EUs AEV抗體為弱陽(yáng)性,應(yīng)被認(rèn)為經(jīng)過免疫或暴露于AEV,油乳狀疫苗也可能引起非特異性低水平抗體。
25-75 EUs AEV抗體適度陽(yáng)性
>75 EUs AEV抗體強(qiáng)陽(yáng)性
【結(jié)果判定及EU單位說明】
AEV ELISA 值 說明
小于15EUs AEV抗體為陰性
15-25 EUs AEV抗體為弱陽(yáng)性,應(yīng)被認(rèn)為經(jīng)過免疫或暴露于AEV,油乳狀疫苗也可能引起非特異性低水平抗體。
25-75 EUs AEV抗體適度陽(yáng)性
>75 EUs AEV抗體強(qiáng)陽(yáng)性
【操作步驟】
1. 將試劑回溫至室溫,通過顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 將1份4×樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中,充分混勻,例如,30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 將1份20×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中,充分混勻,例如,25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 稀釋前將陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品震蕩均勻。
5. 陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl :800μl。將移液器調(diào)到100μl,反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 將稀釋后的陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照分別加入微孔中,每種做兩個(gè)平行,每孔100μl;將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中,室溫下靜置30分鐘。
7. 棄去微孔板中溶液,每孔加入300μl洗滌液洗滌,重復(fù)洗滌2次,在洗滌過程中防止酶標(biāo)板變干。
8. 每孔立即加入100μl結(jié)合物,室溫靜置30分鐘。
9. 重復(fù)步驟7進(jìn)行洗板。
10. 每孔立即加入100μl底物,室溫靜置30分鐘。
11. 不要倒掉板內(nèi)液體,每孔立即加入100μl終止液。
12. 用酶標(biāo)儀雙波讀數(shù)(405nm或410nm作為主要波長(zhǎng),630nm或650nm為參考波長(zhǎng)),計(jì)算結(jié)果。
1. 將試劑回溫至室溫,通過顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 將1份4×樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中,充分混勻,例如,30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 將1份20×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中,充分混勻,例如,25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 稀釋前將陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品震蕩均勻。
5. 陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl :800μl。將移液器調(diào)到100μl,反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 將稀釋后的陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照分別加入微孔中,每種做兩個(gè)平行,每孔100μl;將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中,室溫下靜置30分鐘。
7. 棄去微孔板中溶液,每孔加入300μl洗滌液洗滌,重復(fù)洗滌2次,在洗滌過程中防止酶標(biāo)板變干。
8. 每孔立即加入100μl結(jié)合物,室溫靜置30分鐘。
9. 重復(fù)步驟7進(jìn)行洗板。
10. 每孔立即加入100μl底物,室溫靜置30分鐘。
11. 不要倒掉板內(nèi)液體,每孔立即加入100μl終止液。
12. 用酶標(biāo)儀雙波讀數(shù)(405nm或410nm作為主要波長(zhǎng),630nm或650nm為參考波長(zhǎng)),計(jì)算結(jié)果。
【公司名稱】廣州健侖生物科技有限公司
【】
【】
【電子郵件】 Service@jianlun.com
【騰訊 】 712628580 712628581 712628582
【公司】 www.jianlun.com
【公司地址】廣州市天河區(qū)車陂第十五工業(yè)園一幢4067室
說明書下載:http://www.jianlun.com/download/Products/qin/禽呼腸孤抗體檢測(cè)試劑盒-使用說明書.pdf
禽疫病檢測(cè)系列產(chǎn)品(健侖生物榮譽(yù)出品)
編碼 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
禽病檢測(cè)系列 | |||
JL3101 | 雞新城疫抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3102 | 雞新城疫抗原金標(biāo)檢測(cè)卡 | 20T/盒 | 金標(biāo)層析卡 |
JL3103 | 雞新城疫抗體金標(biāo)檢測(cè)卡 | 20T/盒 | 金標(biāo)層析卡 |
JL3104 | 新城疫血凝及血凝抑制試驗(yàn)抗原 | 2ml | 用于禽新城疫免疫效果的監(jiān)測(cè) |
JL3105 | 新城疫血凝及血凝抑制試驗(yàn)陽(yáng)性血清 | 2ml | |
JL3106 | 新城疫病毒RT/盒-PCR檢測(cè)試劑盒 | 10T/盒 | PCR |
JL3401 | 法氏囊抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3402 | 法氏囊抗體金標(biāo)檢測(cè)卡 | 40T/盒 | 金標(biāo)層析卡 |
JL3403 | 法氏囊抗原金標(biāo)檢測(cè)卡 | 40T/盒 | 金標(biāo)層析卡 |
JL3107 | 禽腦脊髓炎抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3108 | 禽呼腸孤抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3110 | 鴨禽流感病毒抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3601 | 雞傳染性喉氣管炎抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3602 | 雞傳染性喉氣管炎抗體金標(biāo)檢測(cè)卡 | 40T/盒 | 金標(biāo)層析卡 |
JL3701 | 雞減蛋綜合癥EDS76抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3702 | 雞減蛋綜合癥EDS76抗體金標(biāo)檢測(cè)卡 | 40T/盒 | 金標(biāo)滲濾卡 |
JL3801 | 雞病毒性關(guān)節(jié)炎抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3010 | 禽流感病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3011 | 禽流感抗體檢測(cè)試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3012 | 禽流感抗原金標(biāo)檢測(cè)卡 | 20T/盒 | 金標(biāo)層析卡 |
JL3013 | 禽流感H5抗原金標(biāo)檢測(cè)卡 | 20T/盒 | 金標(biāo)層析卡 |
JL3014 | 禽流感H9抗體金標(biāo)檢測(cè)卡 | 20T/盒 | 金標(biāo)層析卡 |